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              產(chǎn)品目錄
              豬乙型腦炎病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
              更新時間:2020-07-03 點擊量:2230

              豬乙型腦炎病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

              說明書

              【產(chǎn)品名稱】

              通用名稱:豬乙型腦炎病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

              英文名稱:Porcine Japanese B Encephalitis Virus Antibody Test Kit (ELISA), JEV Ab

              規(guī)格】

              96×2測試/盒

              【預(yù)期用途】

               本試劑盒用于定性測定豬血清中日本乙型腦炎病毒(又稱流行性乙型腦炎)IgG抗體。用于評估豬場豬乙型腦炎病毒疫苗免疫狀況,感染豬的血清學(xué)診斷以及豬乙型腦炎病毒的流行病學(xué)調(diào)查。

              【檢驗原理】

               本試劑盒應(yīng)用固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理,由包被有高純度的豬乙型腦炎抗原的微孔反應(yīng)板、辣根過氧化物酶標記的抗豬IgG及其它試劑配套組成。其反應(yīng)機理為包被抗原與樣本中的JEV-IgG結(jié)合,再與酶標抗豬IgG抗體形成“包被抗原+JEV-IgG+酶標抗豬IgG抗體”復(fù)合物,加入顯色劑,通過酶催化反應(yīng)顯色。顯深淺與JEV-IgG的量成正比,當(dāng)顯色超過設(shè)定的臨界值時結(jié)果判為陽性,表明免疫有效或有自然感染。

              【要組成成份】`

              1

              JEV抗原包被板

              96T×2

              2

              酶標記物

              22ml

              色帽

              3

              樣本稀釋液

              50ml

              透明

              4

              JEV-IgG陰性對照血清

              1.5ml

              綠色帽

              5

              JEV-IgG陽性對照血清

              1.5ml

              紅色帽

              6

              顯色劑

              12ml×2

              色帽

              7

              終止液

              12ml

              色帽

              8

              20X濃縮洗滌液

              50ml

              白色帽

              9

              蓋板膜

              2張

               

              10

              說明書

              1份

               

              自備器材

              1.酶標儀( 450nm  630nm濾光片

              2.微量移液器(單道1-100ul、0.5-10ul、多道      30-300ul)

              3.水浴箱或恒溫箱

              4.微量振蕩器

              5.一次性槍頭(10ul、200ul)

              6.去離子水

              【樣本要求】

              1.本試劑檢測的樣本為豬血清,樣本應(yīng)無菌采集,2℃~8℃貯存不超過一周,長期應(yīng)在-20℃以下保存,避免反復(fù)凍融。

              2.避免使用嚴重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及污染長菌的樣本。

              【實驗準備】

              1.試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前,先取出置室溫30min。酶標板應(yīng)在室溫中平衡至潮氣干盡后方可拆開。

              2.樣本稀釋:用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋(例:將5ul樣本加至195ul樣本稀釋液中)。

              3.配制洗滌液:將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍(例:將50ml洗滌液加入950ml去離子水中)。若20倍濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶,屬正常現(xiàn)象,放置37℃至溶解后即可。

              【操作步驟

              1.加樣:根據(jù)樣本數(shù)量,取所需板條。設(shè)陰、陽性對照各2孔,分別加入不稀釋的陰、陽性對照血清100μl于相應(yīng)孔中。其余為樣本孔,每孔加入稀釋好的樣本100μl。

              2.溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置37℃溫育30分鐘。

              3.洗板:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液注滿反應(yīng)板孔,洗滌3次,每次停留10秒,后一次洗后拍干。

              4.加酶:每孔加酶標記物100μl

              5.溫育:加好酶標記物后,蓋好蓋板膜,置37℃溫育30分鐘。

              6.洗板:同步驟3。

              7.顯色:每孔加顯色劑100μl,振蕩混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。

              8.終止:每孔加終止液50μl,振蕩10秒,充分混勻。終止后即讀數(shù)。

              9.讀數(shù):以450nm/ 630nm雙波長檢測,讀取各孔吸光度值(OD值)。

              【結(jié)果判定】

              在酶標儀上測各孔的OD值。檢測結(jié)果有效的條件是陽性對照孔的平均OD值≥0.6,陰性對照孔的平均OD值必須<0.1。

              樣品中抗體存在與否,或樣本中抗體的相對水平的高低由S/P值決定,S/P值計算時按以下方式處理:

                S/P=(樣本OD450/630值-NCx(—))/(PCx(—)-NCx(—)),其中NCx(—)表示陰性對照孔平均OD值(0.05以下的數(shù)值按0.05計算),PCx(—)表示陽性對照孔平均OD值;

              當(dāng)樣本的S/P≥0.25時判為陽性;樣品S/P值<0.25時判為陰性。

              【注意事項】

              1.本試劑盒僅用供研究使用。

              2.使用試劑盒之前,一定要仔細閱讀說明書。

              3.實驗廢棄物應(yīng)經(jīng)121高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

              4.未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封4℃保存。未用完的液體試劑應(yīng)蓋好瓶蓋,與其它配套組份放入試劑盒中于2℃-8℃避光保存。不同批號的試劑組份不可混用。

              5.應(yīng)用微量移液器加入本及試劑,并經(jīng)常校對其準確性。

              6.加洗滌液時應(yīng)做到滿而不溢,防止孔口有游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。

              7.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應(yīng)立即用大量清水沖洗干凈。

              【儲存條件及有效期】

              于2℃~8℃避光保存,防止冷凍,有效期12個月。

              【生產(chǎn)日期及批號】

              詳見包裝袋和外包裝盒。

               

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