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              BCA法蛋白含量測定試劑盒說明書
              更新時間:2020-07-06 點擊量:2134

              BCA法蛋白含量測定試劑盒說明書 

              微量法

              注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,確保蛋白濃度在20-2000μg/ml內(nèi)。

              貨號YX-W-C202

              規(guī)格100T/96S

              產(chǎn)品內(nèi)容

              試劑A:液體×1瓶,4℃保存。 

              試劑B:液體×1支,4℃保存。 

              標(biāo)準品:液體×1支,4℃保存。 

              產(chǎn)品說明

              樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。 測定原理: 堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+2分子的BCACu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰ziui qiang。 自備儀器和用品: 

              臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。 

              工作液配制:臨用前請根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×0.2mL),將試劑AB按照501的比例混合,蓋緊后充分混勻。 

              操作步驟:

              一、樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取: 

              1. 液體樣品:澄清液體樣品可以直接測定。 

              2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水)冰浴勻漿,10000rpm4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋) 

              3. 細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000rpm4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。 

               

              二、測定操作: 

              1. 可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到562 nm,蒸餾水調(diào)零。

              • 工作液置于60℃水浴預(yù)熱30 min

               

               空白管 

              標(biāo)準管 

              測定管 

              蒸餾水(μL 

              4

               

               

              標(biāo)準品(μL 

               

              4

               

              待測液(μL 

               

               

              4

              工作液(μL 

              200

              200

              200

              混勻后置于60℃保溫30min,于微量玻璃比色皿/96孔板,于562nm處測定吸光值A(chǔ),分別記為A空白管、A標(biāo)準管、A測定管。

              注意:空白管和標(biāo)準管只需要做一次。 

              三、計算公式: 

              Cpr (mg/mL)= C標(biāo)準品×A測定管-A空白管)÷A標(biāo)準管-A空白管) 

              =0.5×A測定管-A空白管)÷A標(biāo)準管-A空白管)

              注意事項:

              • BCA 法蛋白含量測定試劑盒,適用于測定蛋白濃度在20-2000μg/ml 樣品。測定前取1-2 個樣做預(yù)實驗,樣品蛋白含量太高的話,請稀釋至相應(yīng)濃度范圍內(nèi),以確保測定的準確性。 
              • 待測樣品蛋白提取可用生理鹽水、蒸餾水或PBS 提取。 
              • 由于受測定溫度及時間等的影響,請嚴格按照給定條件測定。

               

              本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途!

               

               

              實驗代做服務(wù):

              ELISA試劑盒免費代檢測

              CCK8檢測

              基因組DNA提取

               

              蛋白相互作用分析

              Western Blot

              免疫組化

              熒光定量PCR

              動物模型服務(wù)

              流式細胞檢測

              ROS氧化分析

              激光共聚焦

              DNA甲基化實驗

              細胞劃痕

              鈣離子濃度檢測

              掃描電鏡實驗

              microRNA測序

              動物實驗

              探針合成

              ATP/ADP檢測

              石蠟/冰凍切片

              定點突變

              線粒體膜電位(MMP)檢測

              細胞生長曲線的測定

              藥理毒理動物實驗

               

              免疫共沉淀

              真核表達載體構(gòu)建

              染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

              非標(biāo)定量(Label-free)實驗

              滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

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