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              法氏囊抗體檢測(cè)的操作程序及結(jié)果判斷
              更新時(shí)間:2021-08-17 點(diǎn)擊量:1197
                法氏囊抗體檢測(cè)采用法氏囊抗原作固相抗原檢測(cè)雞血清中的特異性法氏囊抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
               
                法氏囊抗體檢測(cè)的操作程序
               
                1. 樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清按1:100稀釋,如5ul血清+500ul樣本稀釋液,充分混勻。陰、陽對(duì)照不用稀釋。
               
                2. 加樣反應(yīng):樣本檢測(cè)孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時(shí)設(shè)陰性、陽性及空白對(duì)照各一孔,取陰性、陽性對(duì)照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi),空白對(duì)照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號(hào)液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,每孔加洗滌液(2號(hào)液)一滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,甩去,拍干。
               
                3. 加酶反應(yīng):除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液)二滴,37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
               
                4. 顯色反應(yīng):加底物(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各一滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)一滴,混勻,終止反應(yīng)(加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色)。
               
                法氏囊抗體檢測(cè)的結(jié)果判斷
               
                1.肉眼觀察:陰性對(duì)照接近無色,陽性對(duì)照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
               
                2.儀器判斷:以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值,待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算。
               
                法氏囊抗體檢測(cè)的注意事項(xiàng)
               
                1.試劑盒在2-8℃下保存,每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
               
                2.洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi),每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
               
                3.為提高試驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果,并對(duì)陰性對(duì)照測(cè)復(fù)孔以減少誤差。

              滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

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