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              網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > 植物腺苷激酶(ADK)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
              產(chǎn)品目錄
              植物腺苷激酶(ADK)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
              更新時(shí)間:2025-02-26 點(diǎn)擊量:83

              本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷

              植物(Plant)腺苷激酶(ADK)ELISA檢測(cè)試劑盒

              使用說(shuō)明書(shū)

              檢測(cè)原理

              試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被腺苷激酶(ADK)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腺苷激酶(ADK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

              樣品收集、處理及保存方法

              1.  樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)?/span>疊氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。

              2.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。

              3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請(qǐng)1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè)。

              4.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

              自備物品

              1. 酶標(biāo)儀(450nm)

              2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

              3. 37℃恒溫箱

              操作注意事項(xiàng)

              1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

              2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

              3.  濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度

              4.  嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

              5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

              試劑盒組成

              注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、50、10、20、40、80 U/L

              試劑的準(zhǔn)備

               20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

              洗板方法

              1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

              2.  自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

              操作步驟

              1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

              2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

              3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。 

              4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

              5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

              6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

              7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

              結(jié)果判斷

               繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

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              試劑盒性能

              1.  準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。

              2.  靈敏度:最di檢測(cè)濃度小于10 U/L

              3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

              4.  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

              5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

              6.  有效期:6個(gè)月

              2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶(hù)各類(lèi)實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十余年,是您值得信賴(lài)的科研合作伙伴!

              如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

              實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):

              ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

              CCK8檢測(cè)

              HE染色

              PAS糖原染色

              Western Blot

              免疫組化IHC染色

              熒光定量PCR

              阿利新藍(lán)染色

              流式細(xì)胞檢測(cè)

              免疫熒光染色

              激光共聚焦

              動(dòng)物模型服務(wù)

              石蠟/冰凍切片

              透射電鏡服務(wù)

              掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

              蛋白雙向(2-D)

              蛋白雙向2D-WB

              免疫共沉淀

              原位雜交(FIsh

              蛋白質(zhì)純化

               

              探針合成

               

              DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

               

              瓊脂糖凝膠電泳

               

              藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

               

              番紅O固綠染色

              明膠酶譜MMP

              酶活性檢測(cè)

              動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

              滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

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