1. <i id="2adny"></i>

          <small id="2adny"><dl id="2adny"><small id="2adny"></small></dl></small>

            <i id="2adny"><ins id="2adny"></ins></i>

            1. 国产精品久久久久久久久久三级_日本一区二区在线视频_国产日韩视频在线_性色av乱码一区二区三区_来一水AV@lysav

              產(chǎn)品目錄
              BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞說明書
              更新時(shí)間:2015-06-16 點(diǎn)擊量:1326

              BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞說明書

               

               

              BL21(DE3) Competent Cell

              BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

              目錄號:YJ0809

               

              保存條件:-80℃保存。

               

              組分說明

               

                                Cat. No.                          YJ0809A

                                Size                              10×100 μl

                                BL21(DE3) Competent Cell          10×100 μl

                                Control DNA pUC19,0.1 ng/μl         10 μl

               

              產(chǎn)品簡介

               

                本產(chǎn)品是大腸桿菌  BL21(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于

              DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。BL21(DE3)菌株適合表達(dá)非毒性蛋白,該菌株是以T7 RNA聚合酶為

              表達(dá)系統(tǒng)的外源基因蛋白表達(dá)的宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達(dá)受λ噬菌體

              DE3區(qū)的lacUV5啟動子調(diào)控,該區(qū)整合在BL21染色體上。使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化

              效率可達(dá)10 7

               

               

              本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途 

               

               

                  注意事項(xiàng)

               

                  1.感受態(tài)細(xì)胞一定要用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在  -80℃下保存,不可多次凍融和放

                     置時(shí)間過長,以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。

                  2.轉(zhuǎn)化所有步驟均在無菌條件下操作。

                  3.包裝中有0.1 ng/μl的pUC19DNA,供對照試驗(yàn)使用。

               

                  操作步驟

               

                  1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。

                     以下實(shí)驗(yàn)以50 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。

                  2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量

                     的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。

                  3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘。

                  4.每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150 rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇。

                  5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的   SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,

              倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。

               

                     注意:1)涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板;若轉(zhuǎn)化的DNA總量較少,可取200-300 μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計(jì)的克隆數(shù)較少,可通過離心(4,000 rpm,2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。

              2)新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。

              3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

               

               

              滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

              国产精品久久久久久久久久三级_日本一区二区在线视频_国产日韩视频在线_性色av乱码一区二区三区_来一水AV@lysav
                  1. <i id="2adny"></i>

                      <small id="2adny"><dl id="2adny"><small id="2adny"></small></dl></small>

                        <i id="2adny"><ins id="2adny"></ins></i>

                        1. 德阳市| 遂宁市| 根河市| 武安市| 秭归县| 云浮市| 屏南县| 南昌市| 扎鲁特旗| 祁门县| 方正县| 和硕县| 永康市| 策勒县| 安仁县| 青海省| 时尚| 马边| 图木舒克市| 南阳市| 繁昌县| 东丽区| 大理市| 界首市| 吉水县| 瑞安市| 石城县| 罗田县| 吐鲁番市| 绍兴市| 夏河县| 胶南市| 台前县| 渝中区| 拉萨市| 兴安县| 通海县| 习水县| 察隅县| 大丰市| 衢州市|