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              氯霉素檢測應(yīng)如何正確操作?
              更新時間:2019-07-29 點擊量:2516
                   一、氯霉素檢測具體實行步驟:
                樣品制備
                a)將3克已均質(zhì)的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震蕩5分鐘。
                b)用離心機(jī)離心1700×g10分鐘,取2mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,于50℃下,利用氮氣將有機(jī)溶劑吹干。
                c)在此玻璃管中加入正己烷1mL,先將殘余物*溶解后,再加入1mL樣品稀釋液,震蕩30秒鐘。
                d)用離心機(jī)離心1700×g 10分鐘,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
                稀釋倍數(shù):1
                若待測物為白蝦可按以下流程將樣品做8倍濃縮以增加檢品敏感度
                a)將6克已均質(zhì)的樣品放入15mL離心管中,再加入6mL乙酸乙酯,震蕩5分鐘。
                b)用離心機(jī)離心1700×g 10分鐘,取4mL上層液(乙酸乙酯)至10mL玻璃管中,于50℃下,利用氮氣將有機(jī)溶劑吹干。
                c)在此玻璃管中加入正己烷2mL,先將殘余物*溶解后,再加入0.5mL樣品稀釋液,震蕩30秒鐘。
                d)用離心機(jī)離心1700×g 10分鐘,利用吸管吸去包含中問乳化層部分的上層液(正己烷),再吸取下層液(水層)備用。
                稀釋倍數(shù):0.125
                二、氯霉素檢測的操作步驟:
                1、于適當(dāng)微孔中分別加入100mL標(biāo)準(zhǔn)溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
                2、在另外的微孔中加入100mL已完成前處理的樣品溶液。
                3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標(biāo)記物。
                4、輕敲盤子四周,使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時。
                5、將微孔中的反應(yīng)液甩掉,再將洗液加滿每一微孔后甩掉,重復(fù)洗3次。
                6、較后一次甩掉后,在吸水紙上拍干。
                7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后,輕敲盤子四周,使其充分混合。
                8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
                9、于每一微孔中加入100mL反應(yīng)終止液。
                10、用酶標(biāo)儀于波長450nm下判讀。

              滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

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