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              網(wǎng)站首頁產(chǎn)品展示實(shí)驗(yàn)代做病理學(xué)檢測實(shí)驗(yàn) > 石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光
              石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光

              石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光

              產(chǎn)品型號:

              所屬分類:病理學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)

              產(chǎn)品時間:2024-08-30

              簡要描述:提供商: 上海研謹(jǐn)生物
              服務(wù)名稱: 石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光
              規(guī)格: 實(shí)驗(yàn)服務(wù)
              實(shí)驗(yàn)周期: 1-2周

              詳細(xì)說明:


              石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光



              TUNEL凋亡熒光實(shí)驗(yàn)原理

              dUTP缺口末端標(biāo)記(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL) 法檢測細(xì)胞凋亡的原理是當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時,DNA內(nèi)切酶被激活,核小體間的基因組DNA被切斷,暴露的3-0H可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TerminalDeoxynucleotidyl Transferase, TdT)加上帶有熒光素FITC標(biāo)記的dUTP,從而可以通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測。


              TUNEL凋亡熒光實(shí)驗(yàn)意義

              1.TUNEL法是一種分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,可對完整的單個凋亡細(xì)胞或者凋亡小體進(jìn)行原位染色,可以準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。

              2.可用于石蠟切片、冰凍切片、培養(yǎng)的細(xì)胞等進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測,靈敏度遠(yuǎn)比一般的組織化學(xué)和生物化學(xué)方法要高。

              3.操作簡便快捷,在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。


              TUNEL凋亡熒光實(shí)驗(yàn)步驟:

              1.石蠟切片TUNEL顯色法:

              ①石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,脫蠟劑= =甲苯,至水劑乙醇;

              ②PBS漂洗3*5 min; .

              ③加入蛋白酶K工作液379C反應(yīng)15-30 min, PBS漂洗3x5 min;

              ④4%多聚甲醛(pH7 4的PBS)室溫固定15-30 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑤浸入封閉液(3%H202)室溫封閉10 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑥參考使用試劑盒的說明書配制適量的TUNEL檢測液,其中含有TdT酶、熒光標(biāo)記液、TUNEL檢測液;

              ⑦樣品上加入適量TUNEL檢測液,37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑧選擇是否用DAPI復(fù)染細(xì)胞核;

              ⑨使用抗熒光淬滅封片液封片后在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察。


              2.冰凍切片TUNEL顯色法:

              ①新鮮組織經(jīng)處理后,立即在恒冷冰凍切片機(jī)內(nèi)切片,厚度為5~6 um;

              ②防脫玻片,貼片,室溫陰干約12h;③4%多聚甲醛(pH7 .4的PBS)室溫固定10 min,PBS漂洗3x5 min;

              ④浸入封閉液(3%H20O2) 室溫封閉10 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑤浸入通透液(0.1%Triton X-100溶于PBS中),室溫通透30 S-2 min;

              ⑥參考使用試劑盒的說明書配制適量的TUNEL檢測液,其中含有TdT酶、熒光標(biāo)記液、TUNEL檢測液;

              ⑦樣品上加入適量TUNEL檢測液,37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;

              ⑧選擇是否用DAPI復(fù)染細(xì)胞核:

              ⑨使用抗熒光淬滅封片液封片后在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察。


              結(jié)果展示




              實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

              1.實(shí)驗(yàn)周期: 1-2周

              2.交付標(biāo)準(zhǔn):蠟塊、切片、染色圖片.實(shí)驗(yàn)報告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、耗材等)


              需確認(rèn)的信息

              1.樣本的種屬

              2.樣本的類型(固定的組織or蠟塊or切片)

              3.是否提供試劑盒

              4.拍照要求


              實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

              ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測

              CCK8檢測

              基因組DNA提取


              蛋白相互作用分析

              Western Blot

              免疫組化

              熒光定量PCR

              動物模型服務(wù)

              流式細(xì)胞檢測

              ROS氧化分析

              激光共聚焦

              DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

              細(xì)胞劃痕

              鈣離子濃度檢測

              掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

              microRNA測序

              動物實(shí)驗(yàn)

              探針合成

              ATP/ADP檢測

              石蠟/冰凍切片

              定點(diǎn)突變

              線粒體膜電位(MMP)檢測

              細(xì)胞生長曲線的測定

              藥理毒理動物實(shí)驗(yàn)


              免疫共沉淀

              真核表達(dá)載體構(gòu)建

              染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

              非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)




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                請輸入計算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

              電話咨詢
              • 服務(wù)熱線:
              • 400-665-0203
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